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尼康显微镜绿色激发块G-2E/C(带通)

2015-03-31  发布者:admin 

紫外,可见和近红外透射为尼康的G-2E / C过滤组合光谱图在图1的下方示出该滤波器组是两个在Nikon绿色激发系列,它采用一个带通发射(阻挡)滤波器1代替长通版本,并且旨在限制从荧光团发射的量,组合优化的频带之外的干扰。 60纳米的发射窗口(590-650纳米)是结合了介质25纳米激发通带(528-553纳米),以允许有选择性的激励和检测在多个标记实验中使用的具体流行荧光团。对G-2E / C过滤组合配有一个565纳米(截止波长)长通二色镜。

绿色激发滤块G-2E / C规格:

  • 激发波长筛选:528-553纳米(带通,540 CWL)

  • 双色镜截止波长:565纳米(长通,LP)

  • 屏障过滤波长:590-650纳米(带通,620 CWL)

G-2E / C滤波器组合与流行的荧光探针,如四甲异硫氰酸酯(TRITC)进行了优化,Cy3的,和DII,当单独或多重标记技术被用于他们,并且还建议与红色荧光蛋白的使用( 红色荧光蛋白 )。带通发射滤波器功能,以减少或消除从荧光团发射的深红色或近红外光谱区的干扰。相比,可以在这些应用(如Cy3的集合)中使用的一些其它滤波器组合,所述的G-2E / C组合产生视觉上更红的图像,由于发射的带通(590纳米)的相对高的低波长的限制,不包括大部分的黄色信号。 更高波长带通的附加效果是降低了罗丹明类荧光成像时采集到的信号的总水平。吖啶红,Alexa的荧光剂(546,555,和568),茜素红,BODIPY探头,钙橙,Cy3的,DiI标记,DiIC16,DiIC18,溴化乙锭,NeuroTrace:学习以下荧光团时,G-2E / C套推荐六百一十五分之五百三,碘化丙啶,派洛宁B,RedoxSensor红CC-1,罗丹明衍生物,塞夫龙河艳红和TRITC。 在图2中呈现的图像表明具有多种针对不同细胞内位置吸收绿光的荧光探针的这种过滤器组合的性能。

一对女儿鼠袋鼠(PTK2)上皮细胞,示于图2(a)中,分别为在那些在培养被免疫荧光标记的同随后缀合的山羊抗小鼠Fab片段初级抗牛的α-微管蛋白的小鼠单克隆抗体到的Alexa Fluor 546的吸收最大值的Alexa Fluor 546的是556纳米,并且最大发射发生在573纳米(在可见光光谱的黄色区域)。需要注意的是在整个细胞质中延伸的细胞内微管网络的突出黄橙色染色。奥林巴斯显微镜

呈现在图2(b)是从沾满MitoTracker红CMXRos,它的目标细胞内的线粒体的网络牛肺动脉内皮细胞培养的荧光发射强度。最大吸收MitoTracker红CMXRos的是579纳米,并且最大发射发生在599纳米。另外,将试样同时用DAPI染色(在细胞核靶向DNA;蓝色发光)和BODIPY FL-phallacidin(靶向肌动蛋白;绿色发光)。注意没有信号从蓝色(DAPI)和绿(BODIPY)荧光团,但明亮的橙红色荧光被管状线粒体发挥。

由薄小鼠肾脏的部分沾上多个(3)的荧光团的荧光发射强度被证明在如图2(c)。在组织切片细胞核靶向与核酸探针的DAPI,当在细胞培养物和组织切片结合到DNA,其具有最大激发在358纳米,并且具有发射最大值在461纳米。 另外,低温恒温器部也同时沾上的Alexa Fluor 488麦胚凝集素(肾小球和曲小管)和Alexa Fluor 568鬼笔环肽(丝状肌动蛋白和刷状缘)。注意没有信号的同时从蓝色(DAPI)和绿(的Alexa Fluor 488)探针,但强烈的橙红色荧光因的Alexa Fluor 568中的肌动蛋白和刷状缘的网络的存在。

是HeLa细胞即人免疫荧光标记的同随后缀合的Alexa Fluor 546山羊抗-小鼠Fab片段初级抗组蛋白(锅)的小鼠单克隆抗体,图2(D)中示出。 第一抗体,从HeLa细胞的纯化核级分生产,特异性结合的抗原决定簇,其存在于所有五个组蛋白(H1,H2A,H2B,H3和H4)。 相同的探针(的Alexa Fluor 546,但共轭毒伞素到)被用来从非洲绿猴肾细胞(COS-1)在图2(E)标记的细胞的肌动蛋白。该细胞系不显示显着的微丝通常见于许多上皮培养物,如印度麂,HeLa细胞,和PTK2,而是形成小的原纤维具有更光滑的外观。

从棕榈树( 篦齿苏铁 )microsporophyll薄款自发荧光发光强度呈现在图2(F)。 在植物组织中的内源性的自发荧光产生于各种生物分子,包括叶绿素,β-胡萝卜素,叶黄素和。在绿色激发区域,叶绿素具有吸收带具有低消光系数,但仍然产生荧光的检测水平在550纳米的发射波长和上述(绿色,黄色,橙色和红色)。 为棕榈树组织,注意自发荧光发射强度中的橙色和红色光谱区域的存在,这是强烈让人想起暗视场图像的。