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尼康显微镜黄色激发块Texas Red HYQ(带通)

2015-01-20  发布者:admin 

紫外可见和近红外透射为尼康Texas Red HYQ高性能滤波器组合频谱轮廓下面示于图1.该滤波器组是一个两尼康黄色激发组中,这两者都采用的带通发射(阻挡)滤波器而不是一个长通品种,以便限制从荧光团发射的量,组合优化的波长区域以外的干扰。 在75纳米发射窗(608至683纳米)是结合了介质宽度(55纳米)激发通带(532至587纳米),以允许选择性地激发和检测特定荧光团受欢迎,这是在多个标记实验常用的。 Texas Red HYQ滤波器组合配备有595纳米(截止波长)长通二色镜。

黄色激发滤光片座Texas Red HYQ规格:

  • 激发波长筛选:532-587纳米(带通,560 CWL)

  • 双色镜截止波长:595纳米(长通,LP)

  • 屏障过滤波长:608-683纳米(带通,645 CWL)

Texas Red HYQ滤波器组合被设计,以增加次级荧光的亮度,而不产生在信噪比的相应增加。 更陡的通带是通过增加在两个激发和发射滤光片干涉腔的数量,从而使频谱轮廓之间的更接近创建。 所得更宽和更陡的滤波器通带使该组,以提供更多的激发能量并捕获荧光信号的更高的水平。 该过滤器组合与流行的荧光探针得克萨斯红色和CY3.5进行了优化,当单独或多重标记技术被用于他们,并且也建议由黄色波长的激发荧光等应用。 带通发射滤波器功能,以减少或消除从荧光团发射的深红色或近红外光谱区的干扰。 Texas Red HYQ滤波器组合被设计为尼康Y-2E / C组的较高的能量的变化,与更广泛的激发和发射滤光器透射区域。它适合于用基本相同的组的探针的使用,同时提供对这些发光超出在Y-2E / C发射带的上限改进的性能。(奥林巴斯显微镜)

因为由膨胀激发和发射通带区域允许增加的能量传输,与Texas Red HYQ集合产生的图像通常是亮的并显得比那些从类似Y 2E / C组合更红。 Texas Red HYQ,CY3.5,氨基放线菌素D(AAD),酸性品红,Alexa Fluor 568和594,茜素络合剂,BOBO-3,BO-PRO-3,BODIPY:学习以下荧光当Texas Red HYQ过滤器设置建议,ROX(羧基-X-罗丹明),DiBAC4(5),HcRed,LDS 751(结合的RNA),MitoTracker红,MRFP-1(单体红色荧光蛋白),naphthofluorescein,SYPRO红,SYTO 17(59,61, 64),YO-PRO-3,和YOYO-3。 在图2中呈现的图像表明具有多种针对不同细胞内位置黄色吸收荧光探针的这种过滤器组合的性能。

示于图2(a)是从大鼠袋鼠肾(PTK2线)的上皮细胞进行免疫荧光标记与初级抗波形蛋白(一种中间丝蛋白)的小鼠单克隆抗体的培养的荧光发射随后的山羊抗小鼠Fab片段结合到罗丹明红。 最大吸收罗丹明红的是570纳米,并且最大发射发生在590纳米。 角蛋白是一类形成单丝,中间丝的一种类型,存在于细胞骨架结构的水不溶性蛋白质。 另外,将试样同时染色用DAPI核DNA。 注意没有来自蓝色荧光团(DAPI),其不能有效地由黄色光激发信号的,但是从罗丹明标记波形蛋白中间纤维网的高水平的红色荧光强度。

由薄小鼠肾脏的部分沾上多个(3)的荧光团的荧光发射强度显示在图2(b)。 在组织切片细胞核靶向与核酸探针的DAPI,当在细胞培养物和组织切片结合到DNA,其具有最大激发在358纳米,并且具有发射最大值在461纳米。 另外,低温恒温器部也同时沾上的Alexa Fluor 488麦胚凝集素(肾小球和曲小管)和Alexa Fluor 568鬼笔环肽(丝状肌动蛋白和刷状缘)。 注意没有信号的同时从蓝色(DAPI)和绿(的Alexa Fluor 488)探针,但强烈的红色荧光由于的Alexa Fluor 568中的肌动蛋白和刷状缘的网络的存在。

印度麂的鹿皮沾上的Alexa Fluor 568缀合鬼笔环肽,其结合到细胞内丝状肌动蛋白网络的成纤维细胞的培养,示于图2的(c)。 最大吸收的Alexa Fluor 568的是578纳米,并且最大发射发生在603纳米的可见光谱的橙色区域。 另外,将试样同时用DAPI染色(在细胞核靶向DNA;蓝色发光)和MitoTracker绿FM(靶向线粒体;绿色发光)。 注意没有信号从绿色(MitoTracker)和蓝色(DAPI)的荧光团,它们是不能有效地激发在黄色的波长,但明亮的橙红色荧光的肌动蛋白丝发挥。

图2(D)展示了从HeLa细胞的培养即进行免疫荧光标记的同随后缀合的Alexa Fluor 546的吸收最大值的Alexa的山羊抗-小鼠Fab片段初级抗组蛋白(锅)的小鼠单克隆抗体的荧光发射强度氟546是556纳米,并且最大发射发生在573纳米(在可见光光谱的黄色区域)。 第一抗体,从HeLa细胞的纯化核级分生产,特异性结合的抗原决定簇,其存在于所有五个组蛋白(H1,H2A,H2B,H3和H4)。 注意从两个间期核和单核前期强劲的红色荧光强度。

大鼠胸主动脉(平滑肌)染色的细胞与MitoTracker红CMXRos,其靶向细胞内的线粒体的网络,在图2(e)是示出。 最大吸收MitoTracker红CMXRos的是579纳米,并且最大发射发生在599纳米。 另外,将试样同时用DAPI染色(在细胞核靶向DNA;蓝色发光)和BODIPY FL-phallacidin(靶向肌动蛋白;绿色发光)。 注意没有信号从蓝色(DAPI)和绿(BODIPY)荧光团,但明亮的红色荧光被管状线粒体发挥。

由薄脚轮豆的部分自发荧光发射强度( 蓖麻 )组织表现出如图2(f)所示。 在植物组织中的内源性的自发荧光产生于各种生物分子,包括叶绿素,β-胡萝卜素,叶黄素和。 在黄色激发区域,叶绿素具有吸收带具有低消光系数,但仍然产生荧光的检测水平在580纳米的发射波长和上述(橙色和红色)。 对于以上所说明的脚轮豆薄部分,注意自发荧光发射强度的在红色光谱区的存在,但不存在强度中的低级(绿色和蓝色)的波长。




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