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尼康显微镜激发块HYQ套装

2015-01-15  发布者:admin 

尼康HYQ荧光滤波器组合组包括四个小心平衡高性能集,所有这些并入带通发射(阻挡)滤光片的荧光的一个有限的波长范围内的选择性隔离。 命名为每个HYQ滤波器集合反映了它被设计主要的荧光染料的名称,但其各自的激发范围内,每一种组合可以应用于各种适宜的荧光染料

两个HYQ荧光过滤器集传输绿激发光(TRITC HYQCy3 HYQ),而一个提供黄色区域的激发( Texas Red HYQ),一个是专为橙红色的激发(Cy5 HYQ)。 HYQ滤光片组合的典型特征是更广泛的带通激发和发射滤波器,比起许多标准集,以便提供增加的能量传输和增强荧光信号电平。 作为一个群体,在HYQ过滤器组合提供的光谱范围,包括激发波长从530纳米(绿色)至650纳米(红色),和排放检测,从573纳米(黄色),以738纳米(红外线)的范围。激发滤光器的通带是30,55,或60纳米的宽度,并且被组合为60或75纳米的发射滤波器的通带。

各个HYQ过滤器集的性能可以通过检查标本选择的图像标记与具有相匹配的通带和切割在过滤器上的组合的波长,如示于图1中的有袋动物(大鼠袋鼠光谱曲线的荧光团进行判断; PTK2细胞系在图1中给出)细胞角蛋白中间纤维网(a)的免疫荧光染色与偶联于Cy3的抗细胞角蛋白抗体,而在图1(b)的线粒体(印度麂皮鹿皮成纤维细胞)的标记MitoTracker红CMXRos。 同样地,从肌动蛋白丝的网络(印度麂)荧光在图1(c)示出从将Alexa Fluor 568缀合鬼笔环肽起源。 所有这些探针都在与Nikon HYQ过滤器集组合是有用的。 在深红色荧光发光区域,将Alexa Fluor 647进行良好(在图1的HeLa细胞的细胞核(D))与Cy5的HYQ滤波器组合的组合。

HYQ滤波器集合的高性能设计的功能包括实现更宽滤波器的通带,同时保持高信噪比,与信号频带之间的最小交叉(光谱bleedthrough)。 这些目标是通过使用过滤器制造技术,包含在两个激发和发射滤光片更大数目干涉腔,以产生很陡的切口上,并切断过渡在过滤器传输曲线来实现。 反射和透射的波长范围之间的这些尖锐的边界允许通带附近的精确定位,以彼此从信号交叉的小的性能下降。 其结果是,以提供最高的激发效率和最大荧光检测,同时保持信号的分离在几个荧光团时,他们被组合在多个标签的技术。

设计用于绿色波长激发两个HYQ过滤套,TRITC HYQCy3的HYQ,采用相同的带通滤波器激发(530至560纳米)和二色镜(570纳米截止波长)。 两个检测荧光的橙色〜红色光谱区域,但不同之处在于所述Cy3 HYQ发射滤波器的通带更宽的进一步延伸向低波长的光,在黄色区域中。 Cy3 HYQ组合的75纳米发射通带范围从573到648纳米; TRITC HYQ设置限制排放量,以590至650纳米的更窄60纳米范围内。

对荧光团在较长的波长比由所述两个绿色激HYQ组合提供的激发,在Texas RedHYQ滤波器集合包含一个激发滤光器带通带从绿色至黄色区域延伸(532至587纳米)到下部橙色的波长。 一个595纳米的二色镜的组合截止波长和从橙色延伸到远红(608至683纳米)发射滤波器的通带可容纳一宽范围的荧光染料的,除了Texas Red。 该过滤器的组合是相似于Y-2E / C黄色激发组,具有更广泛的激发和发射带通窗,允许它传送更多的能量,并产生相对亮的图像。 55的宽的传输通带和75纳米的激发和发射滤波器,分别与锐截止通和截止的转换导致更高的性能表征滤波器集合与HYQ指定。

所述Cy5 HYQ滤波器集合是最长波长HYQ组合,并提供了宽60纳米的激发频带跨越整个橙光谱区并延伸到红色(590至650纳米)。 荧光发射检测是可能的,从深冲的波长的75纳米的频带化为无形近红外区域内,并且在许多应用中需要使用CCD或其他红外敏感检测器,用于充分利用。 所述Cy5 HYQ宽的通带与尖锐跃迁为激发和发射滤波器,用于信号产生和检测提供增加的能量,是典型在Nikon HYQ系列滤波器组合。 所述Cy5 HYQ集的发射通带的中心在700纳米,和从663至738纳米的延伸。 低(切上)的波长被定位只有3纳米以上660纳米截止上长通双色镜。

尼康HYQ过滤组合规格

滤镜套装描述

激发过滤器 (nm)

双色镜 (nm)

Barrier
  Filter (nm)

备注

TRITC HYQ

545/30
  (530-560)

570 (LP)

620/60
  (590-650)

Medium Green Excitation Band
  Bandpass Barrier Filter

Cy3 HYQ

545/30
  (530-560)

570 (LP)

610/75
  (573-648)

Medium Green Excitation Band
  Bandpass Barrier Filter

Texas Red HYQ

560/55
  (532-587)

595 (LP)

645/75
  (608-683)

Wide Yellow Excitation Band
  Bandpass Barrier Filter

Cy5 HYQ

620/60
  (590-650)

660 (LP)

700/75
  (663-738)

Wide Red Excitation Band
  Bandpass Barrier Filter


表1
  • TRITC HYQ -绿色波长激发的过滤器组合是专为提高性能,荧光染料,如TRITC和DII。 相比典型地用于本申请中的一些绿色激发套,一加宽激发通带和红移二色镜切口上向一个较高的信号电平,这些荧光团,并允许DsRed的荧光蛋白变体改进的检测和远红色荧光HcRed蛋白质。

  • Cy3 HYQ -绿色激发滤光片组合有类似的组件信息的G-2E / C组,尽管它产生通过扩大通带窗户增加激发和发射能量。 此外,发射通带延伸到较低的波长(入黄),从而导致在那些既明亮和偏向橘黄色的色调的图像。 这是用于检测的花青荧光探针的Cy3,特别是在多标记技术,其中,它减少了从荧光团发射的远红和近红外干扰所建议的过滤器的组合。

  • Texas Red HYQ - 滤波器组合用于与荧光探针Texas Red和CY3.5使用进行了优化,具有更广泛的激发和发射通带比同类Y 2E / C组。 因为所得到的较高的信号电平,和发射通带以波长更长的延伸,相对于在Y-2E / C组,该组合产生了在色调明亮,更偏红的图像。 Texas Red HYQ组合提供了用于探测发射于超出在Y-2E / C发射带的上限波长改进的性能,同时限制从荧光团发射的深红色和近红外干扰。

  • Cy5 HYQ -滤波器的组合是唯一的尼康组设计用于高能量红色波长的激发,并且,虽然优化用于与荧光Cy5标记的使用,所述宽橙黄色到红色激发范围是适合于采用各种应用荧光染料。 在远红到近红外波长荧光产生,相应于发射滤波器的通带,在很大程度上是不可见的人的眼睛,而最有效的检测需要使用的光电倍增管或CCD摄像机。 宽滤波器的带通区域,结合陡峭截止点和截止转换,保持最大的信号分离和信号 - 噪声比,HYQ滤波器系列的特性。奥林巴斯显微镜

四个尼康HYQ滤光片组合使用激发波长为530纳米(绿)至650纳米(红色)。 荧光团的宽阵列已经开发了使用的量,各个HYQ套被设计的绿色,黄色和红色光谱区域内的激发波长的调查。 每个滤波器组页面相关的激发波长类(绿色激发滤光片组为TRITC HYQCy3的HYQ组合,黄色的激发套为Texas Red HYQ,红色的激发集Cy5 HYQ)包括许多编目的表常用染料和荧光探针,和过滤器的组合,使他们能够被可视化。 局部环境显著影响荧光团的吸收光谱和发射光谱的最大值(峰值)波长的光,并且因此,在表中给出的值可能与实验条件而变化。 列表仅意图作为过滤器和荧光团的选择的引导,而不应被认为是详尽的或穷尽的汇编。许多包括在表中的荧光探针是专有的,已经开发了以最小化,同时确保了荧光染料的吸收和发射光谱,并共同荧光滤光片组合之间的最大的重叠光漂白。 注意,由于宽的吸收和发射带,多个在各表中所列的荧光探针也适用于与其它激发波长区域滤光片组合使用。