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奥林巴斯显微镜荧光漂白学术

2014-10-23  发布者:admin 

在光漂白(FLIP)两者荧光丢失和恢复的光漂白(FRAP)后的相关方法是技术通过荧光的光漂白观察细胞内的物质的移动。浮动荧光染料在细胞膜上的特定区域,细胞器(内质网和高尔基体)膜,或这些膜浮动荧光标记蛋白是漂白,损失或荧光的恢复观察,研究流动性横向方向上(参见图1)。被FLIP和FRAP的技术也可以用来确认膜的连续性。

最近的一项研究被进行,其中细胞骨架蛋白标记的荧光染料,以确认构成微管和中等尺寸的长丝(10纳米细丝)发生蛋白如何周转(替换)(Wikstrom等人,1992)。在本研究中提出的技术可以被用于确定是否FLIP发生在末端或在长丝的中间。 

奥林巴斯显微镜用FLIP和FRAP实验最近变得更容易进行,由于使用绿色荧光蛋白(两性平等问题协调)的。两性平等问题协调可以在细胞中表达为融合蛋白与靶蛋白。前两性平等问题协调成为可能,此类蛋白的行为中所需要的细胞骨架蛋白,观察到纯化,荧光标记和导入细胞通过显微注射的方法。

光漂白的荧光损失

细胞器膜中,包括内质网,高尔基体和细胞核的细胞的连续性已被翻转验证。后所感兴趣的区域已被光漂白,荧光迅速被扩散的方法回收。当在同一地区已多次漂白,整个细胞器膜的荧光消失,表明荧光浮在细胞器膜。

荧光漂白后恢复

一种荧光染料预先缀合与靶蛋白分子或脂质膜被漂白时的试样中感兴趣的区域和FRAP是用来观察由扩散的手段,通过染料周转如何在漂白的部分的荧光恢复。