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奥林巴斯显微镜荧光探针的分类和应用

2014-07-21  发布者:admin 

 一般情况下,根据其励磁和排放特性,以及它们的化学和生物特性的荧光探针进行分类。以下表格评论中的每个重要的生物类探针的例子。

蛋白质、 核酸、 糖类、 脂类和毒素

 

  • 受体激动剂/拮抗剂: TRITC 标记金环蛇-受体的分布可以观察到在神经肌肉接头时金环蛇专门与乙酰胆碱受体结合。
  • 抗体: FITC 标记的抗鼠 IgG (或 IgG 和 IgM) 抗体-选定 (二级抗体) 抗抗体 IgG、 IgM (原发性抗体) 从各种动物用荧光染料标记。
  • 亲和素: 德克萨斯红色标记链霉亲和 (或抗生物素蛋白)-这种探头可以用于检测生物素标记的鱼探针或抗体,因为抗生物素蛋白可以绑定具体与生物素。
  • 葡聚糖: 德克萨斯红标葡聚糖-葡聚糖、 多糖 3,000 对 70000 的高分子量用荧光染料或探针 (例如,钙离子探针、 pH 探头或荧光素) 标记。标记的多糖是注入到一个单元格,然后均匀地分布在细胞质中。
  • 血脂: NBD 标记卵磷脂-与膜脂质膜流动性,测量手段光漂白技术 (主要光漂白、 FRAP后恢复),并观察的膜融合过程混合血脂用荧光探针标记。
  • 核苷酸: Cy3 标记筒桩-用于在标签的荧光原位杂交技术 (探头 (通过尼克翻译)。尼克翻译是一种技术的标签鱼探针的 DNA 片段。试剂通常由制造商提供的套件的形式。DNA 降解酶 (头 1) 随机刻痕,在主反应中,两个 DNA 链之一和第二个酶 (DNA 聚合酶 1) 消化来自尼克的 DNA,同时在消化部分合成 DNA。一片广阔的新合成的 DNA 含有荧光染料标记的核苷酸。可代替荧光染料标记核苷酸的生物素核苷酸 (生物素-16-末端) 或地高辛核苷酸 (dioxigenin-11-末端)。
  • Phallotoxin: 罗丹明鬼笔-成捆的肌动蛋白微丝 (应力纤维) 可以观察在细胞中,因为荧光标记的鬼笔和 phallacidin 可以绑定具体与肌动蛋白微丝 (微丝)。

脂质膜的染色

 

  • 膜电位明智探头: WW 781、 RH-155 和 Di-8-ANEPPS-这些染料被纳入细胞膜。他们吸收或荧光强度随膜电位。应使用快速类型染料的反应率约为毫秒为单位)。
  • 细胞器膜特异性探针: DiOC6(3),NBD 神经酰胺,罗丹明 123-这些染料染色专门的细胞器膜、 内质网膜、 高尔基体细胞膜、 线粒体膜等。
  • 示踪探头: DiI、 DIO、 DIA-这些染料被纳入细胞膜和观察的神经延长使用。

染色的细胞质

 

  • 离子浓度明智染料: Fura 2、 印 1、 荧光 3,BCDCF 和窃用-1-膜渗透乙酰氧甲基酯的探针很容易引入活细胞。其荧光强度和励磁/荧光光谱有所不同 (例如,钙离子和 ph 值) 的细胞内离子浓度。
  • 示踪染料: 磺基罗丹明 101 和路西法黄色 CH-这些水溶性染料是微注入的神经细胞的扩展观察的单元格中。
  • 活细胞进行了探讨: 钙黄绿素 AM 和 CFDA (羧基荧光素二乙酸酯)-细胞中酯酶转膜渗透入膜防渗的染料,染料从而捕获它们在细胞内。
  • 核酸染色: DAPI,碘化丙啶,赫斯特荧光染料 33342,溜溜球 1
  • 这些染料与核酸 (DNA、 RNA) 的细胞内绑定,并成为荧光。他们都用来观察细胞核和染色体的形态,确定 DNA 数量。
  • 荧光蛋白: GFP (绿色荧光蛋白和衍生品)
  • 这种蛋白最初从水母中分离并发出蓝色光激励下的绿色荧光。绿色荧光蛋白基因已被孤立和改善,以获得不同颜色的变种。
  • 荧光酶底物:Dihydrorhodamine 123
  • 酶的活性可以测量显微镜荧光染料随着由特定酶在细胞中。
  • 荧光乳胶:FluoSpheres (分子探针)
  • 聚苯乙烯珠有直径在 0.01 和 15 微米之间用于在观测中的运输在轴突,吞噬作用和测量的血液流动,或作为标准的研究确定在荧光显微镜的分辨率和显微镜性能。