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尼康显微镜黄色荧光激发块组合

2014-06-08  发布者:admin 

 尼康黄色激发荧光的筛选器组合包括两个平衡组合包含完全排放 (障碍) 带通滤波器能够有选择性地隔离通过任一荧光发射的橙色、 红色和近红外谱区窄或宽波段。此交互式教程探讨了如何在励磁和排放变化筛选谱线轮廓,以及那些与双色镜,影响信号水平、 筛选器的整体性能和图像对比度组合为黄色区域的荧光基团的激发而设计的。

本教程使用初始化一个随机选定的荧光标本标本图像窗口和窄带通排放 (Y-2E/C; 默认) 黄色励磁的筛选器组合光谱显示的配置文件筛选器设置的谱线轮廓图上出现。组合的筛选器透射和反射光谱叠加到吸收和发射谱吸收利用标签标本的荧光黄色的 (荧光光谱的配置文件并不包括自体荧光植物标本)。在本教程中,使用一个棕色的填充,而用灰色填充表示相应的发射谱介绍了荧光基团吸收谱。在本教程中右下角的黄色框中显示由筛选器设置滑块表示的筛选器组合波长特性。这些值是不断更新,滑块翻译从左到右。

为了运行本教程中,使用筛选设置滑块以浏览黄色励磁的两个筛选器组合之间的过渡。随着滑块翻译从左到右,修改的谱配置文件励磁和屏障的筛选器,以及那旗面镜子,以模拟到光谱的配置更改。注意到不断变化的谱线轮廓并不意味着任何筛选器组合是可能的也不是单个筛选器设置变量 (不实际更改筛选器) 中的谱线轮廓的问候。选定的筛选器集之间的谱线轮廓的变化只被旨在帮助建立在每个光学的块中使用的筛选器组合之间的关系。

可以添加或由选中或取消选中相应的复选框在图表下方从筛选器设置的谱线轮廓图中删除单个筛选器谱(励磁、 排放和旗面镜像)。此外,荧光基团吸收和发射谱可以添加或删除与一组类似的复选框 (光谱剖面)。标本图像同时更改筛选器配置文件以反映变化相反和信号产生的改建的筛选器组合产生的滑块的翻译水平。可以在任何时候使用的选择 A 标本下拉式菜单和利用的标签下方菜单框中列出了选定的标本的荧光团选定的新标本。在许多情况下,标本都染有两个或更多的荧光探针,表现出的荧光与窄和宽的通频带屏障 (排放) 筛选器设置的选择性分离。

尼康黄色激发荧光的筛选器组合组包括纳入单一 (障碍) 带通滤波器能够有选择性地分离荧光发射橙色到红色的光谱区域内的两个仔细平衡的集。这些补充的筛选器组合激励波长范围广的 532 到 587 纳米通频带宽度的 40 至 55 纳米。这两个组合采用同一 longpass 旗面上的镜像 (595 纳米切-)。两个尼康黄色励磁的筛选器集将纳入了带宽的 60 和 75 纳米带通滤波器的障碍。

两个尼康的黄色励磁筛选器设置纳入排放 (障碍) 带通滤波器旨在减少或消除干扰的荧光团排放在远红色或近红外的光谱区域,尤其是对于标有多个探头的标本。两个筛选器组合覆盖相同的一般光谱波段,而在大多数的应用程序中可以互换。Y-2E/C套 40 纳米励磁乐队 (540-580 纳米) 结合排放通 60 毫微米 (600-660 纳米),阻挡了大部分的近红外谱区的深红色。

Texas Red HYQ 组合 (尼康高性能HYQ筛选器组的成员) 有类似光学规格,虽然与更广泛的励磁和排放带通地区 (55 和 75 纳米,分别)。这一组励磁通频带已从 532 到 587 纳米的波长范围,结合 75 纳米排放通频带 (608 到 683 纳米)。增加通频带宽度传输更大的激励和排放能源,从而导致更明亮的图像,以及排放检测进一步扩展到深红色区域。每个互补筛选器组合利用同一旗面镜子,有的切对波长为 595 纳米。这两套提供性能特别优化的德克萨斯州红、 Alexa 流体和使用 Cy3.5荧光染料,虽然他们是适合与一系列的兴奋的黄色波长的荧光团一起使用。由于更广泛的带通窗口,图片使用的Texas Red HYQ集生产反映更红信号的检测,并且有些明亮时相比,那些获得Y-2E/C结合。

尼康黄色励磁的筛选器组合规格
筛选器设置
说明
励磁
筛选器 (nm)
旗面
镜像 (nm)
屏障
筛选器 (nm)
备注
Y-2E/C 560/40
(540-580)
595 (LP) 630/60
(600-) 660
中型励磁乐队
屏障带通滤波器
Texas Red
HYQ
560/55
(532-) 587
595 (LP) 645/75
(608-) 683
宽励磁乐队
屏障带通滤波器
表 1

 

  • Y-2E/C Y-2E/C的筛选器组合为黄色波长励磁设计作为专业筛选集德克萨斯红和 Cy3.5,用的虽然与跨越 (重叠部分的绿色区域) 的黄色波长的大部分励磁带宽,集可以使用与其他荧光染料的范围。带通滤波器屏障传输信号从橙色和橘红色发光的荧光团,同时消除了大多数的红色和近红外发射。

  • Texas Red HYQ -Texas Red HYQ筛选器组合有类似组件配置文件到Y-2E/C集,但与更广泛励磁和排放带通窗口,使它能够传输更多的能量和产生较亮的图像。结果图像也反映出额外的红色荧光信号由于发射滤波器通频带的引伸到红色光谱区域的较长波长。