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尼康显微镜匹配荧光探针与荧光滤光片块

2014-05-09  发布者:admin 

 现代荧光显微镜仪器采用的干涉滤光片和一个二色分束器,以满足用于标记样品中的荧光探针(次)的激发和发射要求的组合。 当这些部件被适当地选择,在显微镜提供了标本的荧光基团的有选择性的激励,并且所必需的图像形成弱得多的荧光发射后续隔离的基本机制。 通过仔细的双色分束器的功能相匹配的激发和发射滤波器的性能,实验组样品特征进行成像上一个黑暗的背景和最高的灵敏度。 这种互动式教学让参观者以确定最佳的选择,目前尼康荧光滤块中最大化的激发和发射效率与特定的荧光探针。

操作教程,首先选择使用的教程窗口的右侧尼康滤镜设置下拉菜单中的滤镜组合。 下一步,选择一个家庭使用的探头级下拉菜单的荧光染料。 对于每个类探头,选择荧光基团是通过荧光团下拉菜单(:更快的操作,选择所需的探头后,通过使用向上和向下箭头键的过滤器设置选择切换快速提示 )提供访问。 

本教程初始化与吸收蓝光的荧光探针(的Alexa Fluor 488)叠加在光谱表征一个合适的尼康过滤器在题为光谱信息的图形设置的光谱范围。 所选择的荧光激发和发射光谱的归一化强度被显示在右侧图中纵坐标( 相对强度 ),而在左侧纵坐标表示的光谱透射数值所选择的滤波器组合( 透射率 )的组件。 谱横截面是通过激发和发射重叠区域的蓝色和红色光的阴影,表示分别。 激发截面(蓝色)对应的荧光团的吸收和激发滤光片透射区域之间的重叠,而横截面为发射(红色)表示的荧光发射和发射滤光片透射区域的重叠部分。 每个横截面重叠的颜色可以使用激发发射复选框来打开和关闭独立。 当任一荧光团光谱复选框被关闭,除去荧光基团的吸收和/或发射光谱的颜色阴影也同样去除。 谱为个体滤波器组部件也可以通过从滤波器光谱的复选框中除去相应的复选标记删除。 传输曲线的励磁 , 分色 ,和发射极标示为蓝色,绿色和红色,分别,并打开和关闭与相应的复选框。 请注意,设置频谱参数和荧光探针峰值波长的激发和发射的重要滤波器旁滤和探头复选框表示。