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奥林巴斯显微镜光学切片与相差和DIC

2014-05-08  发布者:admin 

 一个微分干涉对比(DIC)显微镜超过相衬的主要优点是,利用该仪器在充分的数值孔径而不遭受相位板或冷凝器的环的掩蔽效应,这严重限制了在冷凝器和目标孔的尺寸的能力。 主要的好处是提高了轴向分辨率,特别是关于对DIC显微镜在大光圈大小,以产生良好的高清晰度图像的能力。 这种互动式的教学探讨和比较厚的样品与DIC和相衬的光学切片,并揭示了无限制的光圈效应的优势上取得良好定义的部分。

教程初始化与随机选择的样品中出现的每一个试样的图像窗口的图像。 左侧窗口,标题为DIC的标本的图像,包含具有一个微分干涉对比光学系统所捕获的样本的图像,而当在相位对比成像的右侧窗口( 相位对比试样的图像 )显示相同的试样。 在双窗口中显示的显微镜焦平面是相同的每个标本。 为了操作的教程,使用目的对焦滑块来模拟通过各种轴向焦平面成像同时对标本的影响。 当滑块被转换到左侧,上侧焦平面变得可见,并移动滑块向右揭示了低级焦平面。 一个新的标本可以在任何时候通过使用选择A试片下拉菜单列表中选择。

因为相位对比图像可以变得模糊(或什至遇到反转对比度)时,试样的光程长度的波动在大范围内,该技术应仅限于试样具有十分之一波长或更小的光程差,如前面所讨论。 换句话说,厚的样品,或那些具有楔形结构,一般不适合用于定量调查与相差显微镜。 薄样品也往往在微分干涉对比,以产生高质量的图像,但是在宽孔口采用光学切片技术更厚的试样(具有十分之一和全波长之间的光程差)也可以成像。

在相衬照明孔径是固定的聚光器环的尺寸,并且不能被改变以实现字段的增加或减少的深度。 这种限制阻碍了含显著晕文物标本的观察,这有时晦涩的标本集中的特点,由于重叠的细节强光始发始发的客观焦平面以外。 经常试图图像标本太厚相衬时出现这样的问题。 然而,如前面所讨论的,微分干涉相衬显微镜的光学切片的能力(在宽冷凝器孔径大小)可实现出色的图像,以与相对较厚的样品获得的。

从厚的样品在差示干涉反差大孔径的光学部分的好处是,如图1所示,并与成像相衬相同viewfields。 图1(b)示出从薮枝螅水螅成像在高放大倍率在DIC与冷凝器光圈开口设置为大约95%的目标孔径大小的生殖息肉一个水母芽。 由此产生的超薄光学部分揭示了水母的特点,这只是最低限度的光始发离焦平面遮住重点突出图像细节。 当相同的视场进行检查在相衬(图1(a))时,水母图像由光晕和表现出降低的分辨率,由于光学系统的孔径限制的模糊。

类似的情况是通过1列于图1(C)(f)条。 图1(c)描绘了从帝王蝶( 斑蝶属条纹 ),在北美地区最常见的蝴蝶1重叠的翅膀上的鳞片。 个人尺度是因为晕文物和模糊的功能,是不是在焦点平面的没有区别,如图1(c)所示。 在一般情况下,图像是由许多工件相混淆,使得试样的特性难以破译。 在成像微分干涉对比同一标本(图1(d))消除了许多分散注意力的文物位置远离焦平面,并明确界定在一个单一的翅膀鳞片的表面特征。 同样,犬绦虫黄瓜( 犬复孔绦虫虫 )的腹部内的蛋包揭示了周围个别鸡蛋时,在DIC(图1(f)项)成像锐利的边缘。 然而,集中鸡蛋是缺乏独特结构的相位对比(图1(e)),主要是由于从其他鸡蛋晕位于远离焦平面。

在大型冷凝器孔径尺寸和高数值孔径微分干涉对比光学切片功能对于单一成像焦平面厚厚的阶段标本的关键。 从特征躺在眼前焦平面之外细节和杂散光不包含DIC图像以相同的方式作为相位对比图像,这往往是由卤素工件复杂。 因此,微分干涉对比可以采用稍微不利条件下(非常厚的样品)下得到良好的图像,即使在大景深呈现在相差显微镜相结构是不可能的识别由于重叠的细节。