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奥林巴斯显微镜透射光科勒照明

2014-03-29  发布者:admin 

 透射光显微镜科勒照明的调整是应该实行,直至显微镜的所有严肃的学生掌握了逻辑和相对容易的过程。 在显微镜被接通每次,应该仔细检查,以确保所有的光学元件的正确对准,并保证在灯的中心与所述聚光镜和视场光阑被正确调整为科勒照明。

在图1所示的显微镜采用了先进的外部光源提供照明的显微镜。 灯壳体包含一个视场光阑和聚光透镜,除了钨 - 卤素灯泡。 一个单独的电压调节器提供可调节的直流电压源,该5和12伏之间变化的灯。 现代显微镜通常包含内置到显微镜的基础上,沿与会聚透镜和视场光阑的光源。 显微镜用内部或外部光源科勒照明调整在理论上是相似的,但也有在下面将要描述的过程的某些差异。

在显微镜下,无论是对于克勒Nelsonian,或任何其它策略用于照明的对准的一个重要步骤,是在光源(通常是钨 - 卤素灯泡)的对准。 许多现代显微镜现在有预中心和预聚焦灯,但是老款车型仍然需要光源为中心,重点用户。 我们建议您咨询的车主手册中的说明有关如何灯为中心,并为其他有关照明光源的重要信息。 下面的程序建议对齐外部和内部的灯:

内部卤钨灯

  • 后在显微镜上,完全打开两个视场光阑(通常接近显微镜的光端口)和聚光镜孔径光阑(由套环控制或处理上的聚光器壳体)的灯开关。
  • 有些厂家为扩散光从灯泡发出提供一个磨砂玻璃过滤器。 这个过滤器通常位于邻近所述灯壳在那里它被安装在显微镜的主体中的过滤器保持器。 在进行灯对准前除去此过滤条件。
  • 放置一个片的白纸,磨砂玻璃,剑擦拭,或镜头清洁纸显微镜端口和灯丝的图像将如图2清晰可见。
  • 使用在灯壳体上的调节螺钉旋转灯(因此,长丝)在其保持器也进行移动前后或上下移动。 我们已经构建了一个互动的Java教程的评论灯丝定位的基础知识。 正确地操纵灯壳体调整的组合应确保灯丝是集中在光路径和聚焦的聚光镜的孔径光阑。

图3示出了当灯丝采用上面描述的程序是可见的显微镜光端口的典型视图。 在左侧图3中的端口(a)包含细丝是严重失准和位置不正确聚焦,将完全填充孔径光阑物镜的,也不是后焦平面的图像。 使用在灯壳体平移调整,灯丝被聚焦(图3(b)),然后将光口内的中心(图3(c))。 游客和学生可以练习使用对准下面的交互式Java教程“虚拟”灯丝:

外部钨及钨卤素灯泡

  • 大多数外部光源是老年人和没有预先为中心的灯泡。 在定心外部钨 - 卤素灯的第一个步骤是预测灯丝的图象复印在一个遥远的片材,由一本书或壁支承。 使用调整螺钉或旋钮绕其自身轴线的长丝,并确保它被聚光透镜和视场光阑,它们是外部照明源的一个组成部分的光轴的中心。
  • 放置在外部照射约7-10英寸的距离反射镜位于该显微镜的基座直接下方的聚光器上(参见图1)。许多关于设计用于外部光源的显微镜镜是平凹并具有一个平面(平面)和一个凹边。 肯定的是,光源是从所述反射镜的平坦表面使用外部钨卤素光源时反射。
  • 灯丝应在镜子为中心,如图所示4。 这可以以类似于内部灯的方式通过将一块纸巾在镜子和可视化,其中长丝图像投影进行检查。 进行任何必要的调整,以使外部照明与显微镜的光学轴线。 定心灯丝后,反射镜的位置应以投影反射到聚光器。 通过将一块纸巾在载物台开幕检查。 灯丝应该是失焦,但在载物台开口的中心方形框。

聚光镜和视场光阑的对齐方式

  • 旋转物镜转换器带来10倍的物镜入光路。 下一步,将标本在显微镜载物台上,并使用了粗,细调焦旋钮聚焦显微镜。 这应该是通过缓慢升高显微镜载物台,同时观看滑动,直到它非常接近完成(但不接触!)的物镜。 在这一点上,本阶段将要稍微降低 ,使样品聚焦。 这是,当正确实施,将避免物镜和标本盖玻片之间的冲突的一个重要概念。 看看通过目镜观察,慢慢地降低载物台,用细调焦旋钮,直到试片细节成为焦点。 试样应具备足够的对比度,提供清晰,明快的图像。 一个高度染色生物组织样品是优良的用于明场模式对准显微镜,但光学双折射的样品也可用于当在显微镜配备为偏振光或微分干涉对比。
  • 双目显微镜,调整眼管与您的瞳距一致。 单一的融合图像应通过两只眼睛是不可见的头部显著运动,观看应该是舒适。 如果只有一个人使用的显微镜​​,这种调整不应该要经常做。 许多望远镜头具有分级量表(图5),对应于瞳孔间距离的大小,使显微镜来快速调整眼管不查看通过它们(平均瞳孔间距为65毫米)。
  • 在现代显微镜,眼管类似双筒望远镜的方式进行调整。 然而,在许多老机型,眼管来回滑动在一个单一的平面,并调整它们可能涉及轻微改变显微镜镜筒长度。 不管翻译机制,管子应该被定位在一个距离,该距离能舒适地观看。 接着,旋转包含毕业规则或显微摄影,直到分划板标记出现在大家关注的焦点叠加在一个集中的标本目镜的眼球晶状体。 如果没有标线存在,转动眼球晶状体,直到样本的焦点。
  • 屈光度调节应单独向目镜。 一些显微镜对每个目镜分级刻度,指示相对于所述目镜的主体的眼透镜的位置。 其它模型保持目镜的身体在一个固定的位置牢固地固定在眼管子的销和槽。 第一步是要么排队上装备有这种标记的目镜分级标记或转动眼透镜顺时针最短焦距位置。 接着,集中样品与10倍的物镜,然后旋转物镜转换直到下一个放大倍数的物镜(通常为5倍)为试样的上方。 在这一点上,单独重新调整每只眼睛晶状体(不使用显微镜粗或细的重点机制),直到试样是在大家关注的焦点。 旋转20倍物镜移入光路和调整显微镜的微调旋钮。 重复的眼睛屈光度调整镜头与5倍的物镜(再次不扰民显微镜精细调焦机构),并在显微镜应调整到正确的屈光度设置。 这些设置会有所不同从用户到用户,所以记录的眼透镜的位置,如果目镜有一个渐变的规模快速返回到适当的调整。
  • 正确的屈光度调节允许在用户的左眼和右眼的任何差额补偿,使整个视场通过两个目镜出现在大家关注的焦点。 这也使显微镜通过在物镜转换器的所有不同的物镜保持齐焦。 目镜视度调节也可以弥补常见的视力问题,如远或近近视,允许用户查看样本没有眼镜。 然而,这些目镜调整不会弥补散光,强迫用户有眼睛缺陷检查标本时必须佩戴眼镜。
  • 接下来的一步是慢慢关闭视场光阑(调整可以是对外部灯壳体或在靠近光端口显微镜的基座)到它的最小设定值,直到只有一个模糊的轮廓示出了在视场(图6(a ))。 台下聚光器装上(通常)控制的滚花旋钮上下运动相对于载物台,一个机架上。 调整此旋钮,直至视场光阑叶片是大家关注的焦点,对已经为重点的试样顶部,然后用聚光器螺丝,将视场光阑的图像移动到视场中心(与光轴显微镜 - 图6(b))。
  • 当提升或降低聚光镜聚焦视场光阑叶片,所述弹性膜片的聚焦图像可以具有围绕该叶片红色或蓝色的晕。 这是由于缺乏校正为在聚光镜色差。 具有良好的校正聚光镜将产生很少或没有颜色膜片一个非常尖锐的轮廓。 视场光阑现在打开直到大约四分之三的视场中是可见的,聚光镜,然后重新聚焦(图6(c))。 检查聚光镜的对齐方式,必要时重新调整。 现在打开的视场光阑,直到它刚好超出视场(观察),或在显微摄影的情况下,刚好超出光罩标记定义捕获膜的面积。 打开视场光阑任何更远是不必要的,会导致过多的眩光和对比度损失。
  • 下一个步骤是除去目镜1和同行向下显微镜的管,如图7(a)所示。 当你查看下管,打开和关闭聚光镜孔径光阑看到自己的形象在物镜的后焦平面。 如果有内置到在显微镜底座上的光路中的磨砂玻璃漫射器滤波器,光的均匀发光的圆圈将是可见的。 如果没有这样的过滤器在光路中,你反而会看到灯丝的形象,在图7(b)所示(以取代被删除的目镜,或勃氏镜插入定心或相位望远镜将使这次调整更容易看到)。
  • 这个动作的目的是设置孔径光阑的大小,以最大化图像的对比度,并获得试样的最佳图像,而不会引入分辨率的损失,由于折射和衍射的工件。 一般的经验法则是设置60和90%的整个光盘看出,在目镜管的大小之间的孔径光阑。

在一些情况下,部分封闭的孔径光阑的边缘不是同心的物镜的照明系统后焦平面。 这是因为无论对台下聚光器或物镜的错位,以及制造商的使用说明书应征询正确的定心制度。 有些显微镜是在一个固定的中心位置那是不可能在实验室中改变出厂时的孔径光阑。 暗场和相衬聚光镜通常总是将提供一个定心机构,由于这一步设立显微镜对这些照明方式的重要方面。 聚光镜光圈应该用40倍或60倍的物镜为中心,以避免重新中心的每一个物镜(低倍率物镜,将使用这种方法几乎总是落在可以接受的边界内)的隔膜。

现在,科勒照明已经建立了10倍的物镜,就必须牢记的是,改变到一个更高的倍率物镜将需要外地和孔径光阑的重新调整。 例如,如果你切换到40倍的物镜,你将不得不有点接近视场光阑和重新中心吧(看样品的一个较小的区域)。 还有,聚光镜孔径光阑应稍微打开(在40×物镜具有更高的数值孔径比不10x物镜)。 物镜的每次改变,两个隔膜,必须根据上面概述的步骤来调节。

科勒照明的条件并不在倍率使用较低倍率的物镜(5倍以下)适用。 在准备低倍镜,先对准显微镜,并使用10倍的物镜调整光学通路进行适当的科勒照明。 大多数现代显微镜聚光镜具有顶透镜旋出光路的使用与5倍的放大倍率的物镜和下方,如图8中所示。 其他聚光镜型号有顶级镜头,可以拧松或有聚光镜的旋转炮塔与低和高放大倍率的物镜使用。

当旋开式透镜从光路取出,聚光镜的性能从根本上改变,并且孔径光阑不再起作用,以控制照明光的数值孔径。 为了避免渐晕,聚光镜孔径光阑应打开到其最宽的设定,标本对比度控制与视场光阑,它现在控制照明光的数值孔径。

通过适当地调节显微镜科勒照明,样品将被充分照射均匀,无眩光,提供良好的图像分辨率和对比度。 欲了解更多信息,请咨询我们的理论部分科勒照明和/或基础知识显微镜照明 。 关于显微镜照明的参考材料,也可以在我们的发现参考书目并在部分网络资源 ,其中包含指向其它显微镜的网站。