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奥林巴斯显微镜荧光成像光过滤

2014-03-14  发布者:admin 

 大多数光源发出的大范围覆盖整个可见光光谱的波长。 在很多情况下,然而,理想的是产生光,其具有受限制的波长谱。 这可以通过使用该发送某些波长专门的过滤器很容易地完成,并有选择地吸收或反射不希望的波长。

通常构造采用透明片染色玻璃,塑料,漆明胶(如雷登过滤器)已处理,选择性地传输所需的波长,同时限制其他彩色滤光片。 过滤器今天最常见的两种类型在使用中吸收的去除内部的破坏性干扰和反射波长选定不需要的波长和干扰的滤波器吸收滤波器。 在任何过滤器,有少量的入射光被从表面反射而不管滤波器的构造,并且该光的一小部分也被吸收。 然而,这些文物通常是非常小的,不符合过滤器的主要功能造成干扰。

吸收过滤器 -这些过滤器通常构造染色玻璃,漆明胶或合成聚合物(塑料),并有广泛的应用。 它们被用来建立在许多照相应用特殊效果,被广泛用在电影行业。 此外,吸收滤波器通常在汽车,船只和飞机标志和交通信号和定向信号找到。 下面(图1)的示意图示出了被设计来适应摄像机镜头品红滤波器。说明明胶和玻璃滤光片如何上漆工作。

在图1中,3入射波为红色,绿色和蓝色,但旨在代表所有组成的白色光的颜色。 过滤器选择性地透射入射白光光谱的红色和蓝色部分,但是吸收了大部分的绿色波长的光。 正如我们在上一节讨论的原色 ,通过从白色光中的绿色所获得的紫红色。 一个典型的滤色器的光调制特性示于图2。 在这种情况下,我们正在研究一个色彩校正滤镜,增加了50个色彩补偿(CC)单位入射光的一个因素。 色彩校正滤镜的细节将在讨论色彩校正一节。

在上面的图2,吸收作图是通过品红滤波器通过的可见光波长。 吸收的光的强度的峰值降至约550纳米,就在可见光波长的绿色区域的中心。 该过滤器还吸收一些光在蓝色和红色区域,表示该过滤器是不完美的,所有的波长的一小部分,但不穿过。 一个完美的过滤器将有一个非常尖锐的峰中心在关闭落后于非绿色波长吸收为零的绿色区域,但是这几乎是不可能完成的与可以以合理的价格来制造真实世界的可见光吸收过滤器。 这种类型的不需要的吸收通常被称为二次吸收 ,是最常见的过滤器。

干扰过滤器 -这些过滤器自吸过滤器中的事实,他们反映和不需要的波长消干涉,而不是吸收他们不同。 术语分色源于过滤器出现在与透射光和另一个与反射光照明一种颜色的事实。 在下面的图3中所示的品红分色滤光镜的情况下,绿色的光从过滤器的表面反射和品红的光从过滤器的另一侧传送。

二向色滤光片使用的是使用真空蒸镀沉积到光学级玻璃多层薄膜涂层制造。 这些过滤器有四种基本设计类型:短波通,长波通,带通和陷波滤波器。 二向色滤光片是更为准确和有效的在他们相比,凝胶和玻璃吸收过滤器,以阻止不需要的波长的能力。 短期和长波长通二向色滤光片作为名字所暗示的,允许的或长或短的波长只有窄带传输,反映了不需要的波长。 带通二向色滤光片是最常见的,其目的是在可见区发射所选波长。 下面(图4)图中示出了一个典型的带通二向色滤光器的透射光谱。

在该曲线图中我们画出了由过滤器发送与传输的百分比的波长。 注意,最大波长是在550纳米 - 右中的绿色区域的中心。 此过滤器是比上面讨论的玻璃或涂漆凝胶品红滤波器更有效,因为没有多余的波长和二次传动装置是几乎不存在几乎没有通道。 二向色滤光片的最后一种类型被称为陷波的波长滤波器,它通过“开槽出”或消除不必要的波长。 陷波滤波器是有效的带通二向色滤光片的对面。 使用在小区中示出的例子中,一个陷波滤波器将通过被阻止与带通滤波器的红色和蓝色的颜色的波长。

二向色滤光片通常用于许多应用,包括专门用于过滤光学显微镜和摄影。 高品质的彩色放大机采用二向色滤光片(而不是吸收过滤器),以微调光的通过彩色负片或透明传递的颜色。 这可让摄影师在摄影照片色彩校正控制程度高。(本文来自:奥林巴斯显微镜荧光成像光过滤

色彩校正 -摄影师和显微镜常常必须作出轻微修改在照明的照相放大器的颜色和显微镜光路,以确保准确的色彩再现。 这通常是用柯达彩色补偿 (简称CC)的过滤器,可以被放置在放大机或显微镜的光路中。 虽然我们指的是柯达滤波器这里,有各种各样的生产这些过滤器与染色凝胶或二向色玻璃制成的厂家。 这些滤波器都标有一个数字,对应于过滤器的光吸收能力,典型地在某种程度上任意范围的05,10,20,30,40,和50所示,下表中的青色过滤器。

过滤器 
指定
 
发送
近似 
变速器
峰值滤波器 
密度
05(CC05C) 8.9 89% 0.05
10(CC10C) 7.9 79% 0.10
20(CC20C) 6.3 63% 0.20
30(CC30C) 5 50% 0.30
40(CC40C) 4 40% 0.40
50(CC50C) 3.2 32% 0.50
表1

随着数字增加,更多的光被吸收,因为过滤器是越来越暗。 在上面的例子中,青色滤波器的范围从05到50的特征,其中的背景颜色表中对应于近似滤波器的颜色。 30青色滤波器(称为CC50C(青色)滤波器)降低了补色的50%或1曝光步骤(f值)的强度。 对CC滤波器可作为雷登滤波器(大小为2“×2”或3“×3”),在6种不同的颜色:蓝,黄,绿,品红,青色和红色和在几个浓度(如图所示于表1和2)。 记住他们使用最简单的方法是咨询“颜色补偿三角”,如图5所示。

只要按照箭头从顶点到另一侧,或从一侧到另一顶点。 您也可以参考表2为正确的CC滤镜的颜色。 例如,一个绿色铸造是通过使用CC品红过滤器去除。 所选择的CC滤镜的适当密度必须由试验风险来确定。 见约翰DELLY的“ 摄影通过显微镜 “为色偏彩色插图。

颜色要 
减少
颜色 
补偿
过滤器 
需要
蓝色 黄色 CCY
青色 CCR
绿色 品红 CCM
黄色 蓝色 CCB
青色 CCC
品红 绿色 CCG
表2

当进行(通过显微镜摄影)涉及显微实验中,我们经常增添色彩补偿滤镜入光路。 这是最容易被塑造成过滤用剪刀一个圆圈,插入仅次于扩散滤波光路来实现的。 或者,柯达销售的形体雷登过滤器可以放置在显微镜正上方的视场光阑的光端口上的小的金属框架。 这允许在所得到的显微照片全局色彩校正