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奥林巴斯显微镜:荧光和DIC的组合

2013-10-16  发布者:admin 

光漂白的影响减到最小,荧光显微镜可以不破坏与其他技术相结合的荧光染料,如微分干涉相差(DIC),霍夫曼调制对比度(HMC),传送暗场照明,相位相反的。

fluo ro dic

我们的想法是找到一个感兴趣的具体领域使用非破坏性的对比度增强技术,然后在一个标本,没有搬迁的标本,在显微镜切换荧光模式。这种类型的一个典型的实验的结果示于图1。图1(a)示出的大鼠视网膜视神经神经节组织薄截面使用微分干涉对比成像。显微照片,图1(b)中示出的相同的视场,但是这一次成像使用荧光照明(汞蒸气灯和一个奥林巴斯WU过滤器立方体)细胞染色蓝色荧光染料,重氮盐,具体污渍磷脂在髓鞘。图1(c)示出这两种技术的组合使用,以产生出漂亮的荧光染色镜片叠加在微分干涉对比度的图像的视网膜的神经节脂组织的显微照片。此图片是一个专门的记录的荧光物镜设计允许同时观察荧光和微分干涉对比具有相同的目标。

dic fluo rescence

同时使用微分干涉相差(DIC)和荧光照明通常用来同时图像标本的显微镜配置在图2中示出。DIC进行采用透射光提供由钨卤素灯的位置连接到显微镜的基础上在一个灯箱。通过视场光阑的光被反射到台下聚光镜由设在冷凝器的前焦平面通过渥拉斯顿棱镜。

 

试样衍射的光首先通过客观的后侧焦点面附近定位在中间像平面与试样未衍射的光通过干涉之前的第二Wollaston棱镜。同时,紫外线灯发出的由水银燃烧器通过一个激发过滤器,然后由二向色镜反射来自上述检体上。二次发射的荧光通过附加的染色标本的发色基团被捕获的目标和通过屏障过滤器,对准目镜和/或光电管。此配置可用于图像标本使用的技术(荧光和微分干涉对比)单独或结合使用。