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奥林巴斯显微镜:莱因伯格照明系统的介绍

2013-10-16  发布者:admin 

光学染色的一种形式,莱因伯格照明Rheinberg Illumination,最初是展示皇家显微学会和Quekett的俱乐部(英格兰)在一百多年前由英国显微镜朱利叶斯莱因伯格。这种技术是一个显着的变化,从低到中等功率暗场照明使用彩色明胶或玻璃过滤器提供丰富的标本和背景颜色。

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可以的莱因伯格技术相比更熟悉的暗场照明。在暗视野显微镜,台下聚光器配置,使来自灯的光的光线,通过聚光镜,将试样通过只在很斜的角度。遍历聚光镜的光锥的中心区域是闭塞装置,不透光的光阑直径足够大,以防止光线直接进入显微镜物镜。在更复杂的暗场聚光镜 - 抛物面形,心形,卡塞格林或Leuchtbild - 闭塞的斜光线直射光的利用率只达到使用专门设计的镜面。

在暗场照明,选择的物镜的数值孔径(通过一个物镜的的光圈或漏斗停止或减少),所以,从聚光镜的光不能直接进入物镜。唯一的光线,并进入物镜的光的反射,折射或衍射的试样时,从聚光镜一击试样的倾斜射线。试样,然后出现明亮否则黑场,故名暗场照明。与之形成鲜明对比的黑场明亮的物体上增加已经解决的细节的可视性。暗视野聚光镜可以在图1中的插图来近似取代的不透光的光阑时,绿色过滤器的中心,除去红色斜光滤波器,使未经过滤的白光通过。

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位莱因伯格照明(图1中示出),这是关系到暗视野中,数种形状的过滤器使用。斜或外光线通过一个开阔的明视场聚光镜通过一个环形(面包圈状)滤波器中的一种或多种颜色(显示在图1和图2中的环形过滤器的红色滤色器);中央光线的光线通过另一点状的过滤器装配到圆形开口的环形过滤器,如在图2中所示的几种组合。我们的物镜是在全开光圈。在这种特定的情况下,试样将显示为绿色背景上(图2A)),黄蓝色背景上(图2b)),或红色背景上的绿色(图2c)是红色) 。

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制备用莱因伯格滤波器,或制造的,透明的,环形的,如图3中所示的中央有圆形开口的色环的形式。在这些过滤器的商业化版本中,透明色的斑点或中央过滤器附带的一套紧贴到开口的圆环(图4)。中央过滤器的直径的通过增加从外圈(图4(交流)),单独的过滤器的窄的黑环的尺寸,可以是多种多样的(背景照明强度调制)。有效的组合,包括:红环,紫罗兰中央过滤器;橙黄色环,蓝色中央过滤器,等等。其他直观有效的图像是由用有颜色的中央过滤器使用一个明确的未着色环。例如,一个红色的中央过滤器会产生一个明确的环红色背景上的白色或无色的图像。

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实际上,外圈变成了检体的颜色和中央过滤器变成了背景颜色。也可以在外圈分为交替扇区的色彩,如在图5中示出。部门的过滤器是特别有效的防翘曲的布料,晶面,硅藻,木节的长度,宽度尺寸在将显示在对比色的研究。

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多年来,一些显微镜制造商在彩色凝胶出售莱因伯格过滤(类似到柯达雷登过滤),预切,以适应他们的显微镜台下过滤环。圆环的外径为31-35毫米,中央过滤器,通常使用具有10- 0.25 NA物镜的直径为15-18毫米。在实验室中使用柯达雷登过滤器或彩色过滤器被广泛使用在科学供应 ​​的房子和光学元件分销商,这些过滤器也可以很容易制作。明胶滤镜可以通过切割中央过滤用软木塞螟适当的直径,圆环,可以制备通过仔细地在滤纸上画一个圆圈,用一把剪刀切割出来。在我们的实验室,支持机械师构建一个的铜压铸削减环形滤波器的圆直径相同我们莱因伯格过滤器支架。该模具可以迅速从醋酸或明胶彩色滤光片张邮票非常流畅界。可切割的环形滤波器的中心具有相同的软木螟用于制备中央过滤。

有时,它是困难的,提供了坚实的环状的过滤器壳体内的中央过滤时,这些都是非常薄的醋酸盐或明胶滤镜。在这种情况下,你可以只是磁带的中心环形滤波器双面胶带中央过滤过,但请记住,中央过滤器和环形滤波器的色彩会增加,所以使用一个非常黑暗的中央过滤器过滤器。中央过滤器,在一般情况下,应远远比环形滤波器暗,允许标本突出的背景形成鲜明对比的是。我们经常放置两个或三个相同颜色的中央过滤器堆栈中的,调整光的透射率,通过中央过滤件。莱因伯格过滤器还可以用玻璃过滤器,这是很方便的与这些过滤器的外壳时,台下聚光器安装。在这种情况下,最好是简单的磁带到玻璃过滤器的中心的中央过滤。对于那些有兴趣在自己的过滤器,一个更完整的讨论是在李约瑟的实践使用的显微镜,我们的参考书目中列出。

我们比较了明暗场,莱因伯格照明技术,使用的鹿蜱(dammini),如图6的显微照片。第一个显微照片(a)表示的在光照下的滴答声。图像的明暗对比,很多细节是很难解决的。图6b)示出相同的暗场照明下的滴答声,存在许多虱子的功能,更高的对比度和细节是显而易见的。虱子使用蓝色的中央滤波器和一个黄色的圆环(参见图2b)条),导致增加对比度的效果,类似于暗视野莱因伯格照明(图图6c)),但是,具有令人愉快的蓝色背景。在这个例子中,暗场和莱因伯格的照明技术,产生显着的更好的显微照片比明场。

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20世纪30年代后期,卡尔蔡司制造的一种特殊的聚光镜Mikropolychromar,设计,生产美丽莱因伯格图像。这聚光镜生产出来的长,现在几乎用不上,但它包括了齐明聚光下有三个独立控制的隔膜。最外层的隔膜控制该字段的直径,并且两个较小的隔膜控制盘中央的光通过。各种颜色的环形透明环集的一部分。伴随着这些组是一个透明的玻璃中央的磁盘漂亮地嵌合到环形圈的中央开口。这种巧妙的聚光镜的作者之一(M.阿布拉莫维茨)已被用于在不同的放大倍率,其中一些已经出现在出版物全方位,时代生活,科学美国人以及国家野生动物保护产生引人注目的显微照片。

照明莱因伯格是适合物镜,从2倍到100倍不等。然而,为了清楚地分开的内和外的颜色,不透明的金属或纸环应放在围绕该中心的过滤器。例如,可能具有的不透明环的外径为10倍的物镜15-18毫米,和22毫米的外径可能会对最好为60倍的油浸物镜。这是一个很好的主意,尝试使用类似的中央过滤器如图4所示,以达到最佳的结果与莱因伯格照明。

为了研究纤维,原虫,纺织品,昆虫,木节,水晶,或其他未染色的低反差的主体,显微镜应考虑加入莱因伯格照明库对比度技术。这将是可以查看和照片标本产生视觉增强的图像,以及外型美观。

从作者的最后一个注意事项:尽量显微镜制造商和/或独立配件制造商,他们生产莱因伯格的聚光镜和过滤器使用显微镜。必要的组件将非常廉价的生产,将极大地帮助显微镜显微镜照明莱因伯格