设为首页 | 添加收藏 |sitemap |百度地图 |
货真价实 坦诚无欺
新闻资讯

徕卡显微镜的景深,如何形成清晰的图像

2013-10-16  发布者:admin 

显微镜,景深常常被看作是一个经验参数。在实践中,它是由数值孔径之间的相关性,分辨率和放大倍率。为了获得最佳的视觉印象,现代显微镜的调整设施的生产领域和分辨率之间的最佳平衡深度 - 两个参数,这在理论上呈负相关。

Intro_Depth-of-field_03

视觉景深的实用价值

在DIN / ISO标准中,字段的对象侧上的深度被定义为“物体面的两侧上的空间内的轴向深度,可以移动对象图像中没有检测到损失锐度,而的图像平面的位置和物镜维持“。

但是,标准的不给任何线索如何衡量检测阈值恶化的焦点。作者首次发表的主题明显经验丰富的景深是最大贝雷,早在1927年出版了他广泛的实验结果。贝雷公式给出的视觉景深的实用价值,因此一直沿用到今天。在其简化的形式,如下所示:

Ţ VIS = N [λ/(2×NA²)+ 340um/(NA×M TOT VIS)]

Ť VIS:视觉经验的深度的领域,n:折射率介质中的对象是位于。如果对象被移动时,输入的介质的折射率,形成不断变化的工作距离在方程。λ:所用的光波长,为白色光,λ= 0.55微米,NA:数值孔径的对象侧上,TOT VIS:总VIS视觉放大倍率的显微镜

如果在上面的方程中,有效的放大倍数(M TOT VIS = 500 1000×NA)的关系的总的视觉倍率被替换,可以看出,第一个近似值,景深的平方成反比的数值孔径。

How-sharp-images-are-formed_Fig1

图 1:景深为一个函数的NA为λ= 0.55微米,n = 1

 

特别是在低放大倍数,景深可以显着地增加,通过停止下来,即减少的数值孔径。这通常是用在共轭平面上的孔径光阑或隔膜。然而,较小的数值孔径,较低的横向分辨率。

因此它是一个问题,找到最佳平衡,根据该对象的结构的分辨率和景深。现代光学显微镜的高分辨率目标(高NA)和可调光圈隔膜,实现灵活的匹配要求的特定的样品的光学。在体视显微镜的情况下,往往是必要的z维度的三维结构作出了一定的妥协赞成较高的景深,频繁地要求。

 

更为景深

一个复杂的光学方法取消分辨率和景深之间的相关性,体视显微镜是徕卡公司FusionOptics™。在这里,其中的光路提供了一个与观察者眼睛的图像的高分辨率和低的景深。通过第二光路径,另一只眼睛看到对同一个对象的图像具有低的分辨率和高的景深。

 

人类的大脑将两个单独的图像到一个最佳的整体形象,同时具有高分辨率和高景深。

 

另一个例子,说明人类大脑的惊人能力是格里诺体视显微镜。在此,该对象的左侧和右侧的光路的平面是彼此以一个小角度。在整体图像中,显示的整个阴影区域重点突出,虽然这不是在左或右图像的情况下。

How-sharp-images-are-formed_Fig2

图 2:对象平面的景深范围格里诺体视显微镜


在数字图像处理领域的深度

徕卡应用程序套件(LAS)的多聚焦模块的开发是为了延长了许多倍的自动显微镜的景深。照明,图像的亮度和所有其他的相机参数可以单独设置,优化所产生的图像质量。

 

LAS多聚焦模块提供了一个简单的解决方案,通过全集成控制电机焦点显微镜捕捉实时图像扩展景深。自动捕获的z栈连同与智能图像组合算法,保证轻松摄影和重点突出的图像存储。

 

多亏了自动化的处理例程,几乎没有任何需要用户干预。的设置可以很容易地改变具有宽范围的样品。多聚焦模块是在材料科学,法医学,以及在生物和地球科学的应用非常有用。