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奥林巴斯显微镜:暗视野显微镜故障排除

2013-10-16  发布者:admin 

有许多相关的常见问题与暗视野显微镜和显微摄影或数字成像。 这些范围从使用不正确的大小视场光阑足够的照明和聚光镜失准。 暗场照明问题都与台下聚光器,这应该是第一个问题,当事情不正常工作。 成像标本时使用这种技术,下面的问题和解决办法应作为一个指南。

问题: 
有足够的照明,使样本可见,,或试样是可见的,但非常微弱的。

解决方案 :灯电压可设置得太低,或灯泡可能没有足够的强度,以适当地照亮试样。 最多约12伏的电压升高(为12伏,100瓦钨卤素灯泡)或更换光源,如果可能的话,与一个更大的强度。 如果不解决这个问题,检查台下聚光器,以确保其适当的大小与视场光阑的正确定位。 另外,检查的颜色和/或中性密度滤光片,偏光片,相位差板,或任何其他组件,可能减少照明强度的光路径。 

如果这个问题出现高数值孔径反映聚光镜,检查聚光镜顶级镜头是正确的显微镜幻灯片底部的油。 如果浸没接触已被打破,重新把聚光镜油和架起来,直到顶端透镜完全浸在油中,并在与底部的滑动接触。

问题: 
视野有一个黑点在中心,减少光照强度,但在外围的对象是良好的照明和显示正常。

解决方案 :要么是不正确的位置台下聚光器或光站的物镜是错误的大小。 小心地机架物镜向上和向下,同时观察在视野标本。 进行检查,以一定的,两个聚光镜光圈和视场光阑被设置为敞开位置。 如果这并不影响照明,使它稍大或稍小的改变视场光阑的大小,然后重新检查照明。 

有时候,这个问题产生,当显微镜载玻片过厚(更大的比标准1毫米的)。 使用千分尺或一组表卡尺来确定的厚度的滑动和滑动/盖玻片组合。 如果滑动过厚时,要么改变正确的厚度的滑动或者“检查聚光镜,以确定它是否可以进行调整,以补偿不同厚度的幻灯片。

问题: 
灯往往有一个很短的寿命,并与黑色蒸发钨涂层的灯泡内部的烧结。

解决方案 :在过高的电压很长时间,这肯定会减少寿命的灯泡已使用。更换灯泡和灯电压降低后观察和/或试样的显微摄影。

问题: 
图像具有的明视野周边带或不带在中心的暗区。

解决方案 :这个问题是典型时,台下聚光器错误地居中或视场光阑是太小了。 恢复到明视场,并重新建立的科勒照明条件,然后重复暗场过程中,确保聚光镜的中心。 如果这没有帮助,增加视场光阑的大小,直到适当的暗场条件成立。 

这个问题也可能出现时使用的物镜,过高的暗场聚光镜的数值孔径。 如果在物镜内部有一个可变光阑,降低光圈孔径的大小来确定,如果太多的斜光进入的物镜前透镜。 此外,它可能有助于提高到一个更高的数值孔径反射的暗场聚光镜的视场光阑的大小或更改。

问题: 
仅在一侧的外围的视野是光明的。

解决方案 :检查物镜转换器,以确保物镜被正确地定位在光轴的显微镜。 有一个定位的物镜是适当的位置时停止,将产生一个正的“啪嗒”。 如果不正确的中心视场光阑,也可能会出现的问题。 取下目镜,并把相望远镜的眼睛管(或使用伯特兰透镜),然后使用中心的螺丝以正确对齐视场光阑。

问题: 
图片的标本不明确,缺乏足够的对比度和细节。

解决方案 :暗视野显微镜的样本可能不适合。 许多染色标本不分散足够的光线暗场条件下可以清楚地成像。 试样的厚度,也可能是一个问题,因为非常薄的样品往往不成像以及从暗视野聚光镜发射与倾斜光线。 切换到明场,相衬,DIC,霍夫曼调制对比度,以确定这是否提高了标本的对比。

问题: 
明亮的区域,重点阻挠的暗场标本的观察和/或显微摄影。

解决方案 :这可能是由于灰尘,头发,纤维,和/或聚光镜上方某处的光学表面的脏物污染。 彻底清洁标本的光学级组织或棉花。 有时候,这个问题的产生是由于在物镜前透镜的污染。 小心地松开物镜,其所在地的消防水枪,慢慢地打开,而通过目镜观察样品。 如果阻塞随着旋转的物镜,那么它可能是由于灰尘上的前透镜。 删除的物镜和滋润镜头前轻轻地呼气,然后再用镜头纸或棉签包裹的长木杆。 更换的物镜和检查,以一定的阻碍已被完全删除。

问题: 
均匀地照亮的背景,但不是全黑或出现灰色的颜色。

解决方法 :这个问题通常发生在不透明的场站为物镜太小。 取出的目镜和查看的后焦平面上的一个光路中的样本的情况下,无论是用相位望远镜或伯特兰透镜的物镜。 整个背部焦平面应该是黑暗的,没有任何边缘明亮的光线出现在周围。 如果观察到的光的弧或圆中的物镜的后焦平面上,改变到一个稍大的视场光阑。 此外,降低视场光阑的大小,将有助于在抑制眩光和一个乌黑背景,(注意不要关闭虹膜光圈太多)。

问题: 
聚光镜的图像部分地填充视野,遮蔽试样的细节。

解决方案 :可调节的滑动可能太薄或聚光镜的太高。 测量厚度的显微镜幻灯片进行检查,以确定油接触不破。 如果遇到困难,保持底部的幻灯片油,请尝试使用较厚的幻灯片。

问题: 
颜色出现在背景中,或用灰铸铁的背景光线不均。

解决方法 :这个问题经常发生在整个很厚的坐骑,或过多时,散射光污染工件的安装介质中捕获。 倒闭的视场光阑和旋转标本,以找到最好的方向,然后确定问题是否已得到纠正。 试样可以被重新安装在较薄的装载或安装介质,可能需要进行过滤。 用柔软的镜头纸或棉签小心地清洁整个的显微镜载玻片和盖玻片。

问题: 
查看水生生物的在水性安装,标本漂在一个单一的方向不断,难以观察和显微摄影。

解决方案 :对流电流正在创建在盖玻片的边缘由于缓慢蒸发。 放置的胎圈,凡士林或Cytoseal安装牢固地密封到显微镜载玻片上的周围介质的外周的盖玻片。 商业产品是可用的,可以被加入到水中,以减缓这些微小的生物体的运动,使得它们更容易拍摄。

问题: 
当观看试样通过10x物镜,有一个长椭圆形的光点的中心的视野

解决方案 :聚光镜可能被错误地聚焦或扩散过滤器可能会丢失,导致的图像出现在视野的灯丝。 重新聚焦在聚光镜和作出若干光路中的过滤器是一种扩散。

问题: 
视野有亮点,有问题的样本与实现大家关注的焦点。

解决方案 :小气泡可能被困在聚光镜的顶部和底部的显微镜载玻片之间的油。 取出的目镜(或插入伯川德透镜)观察的后焦平面上的物镜,其中的气泡将是可见的。 为了弥补,打破油接触,并用棉签除去残留的气泡。清洁聚光镜的前镜头与显微镜玻片上多余的油,然后申请一个干净的滴油的镜头。 如果问题仍然存在,彻底清洁所有的光学表面,然后再重新将油。

问题: 
在高放大倍率,胶体粒子显示不完整的牛顿环,并出现不均匀的照明。

解决方案 :聚光镜可能是偏离中心。 切换到低功耗的物镜和中心聚光镜。 仔细检查,以确定更高的功率物镜是否具有不同的中心,及若有,显微镜光轴中心的物镜