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案例应用

徕卡显微镜神经学的应用

2013-10-16  发布者:admin 

徕卡显微镜神经科学的应用

 徕卡显微镜神经学的应用

与急性切片的准备工作

作为一个严格的监管,高度复杂的细胞网络的神经系统。除了获得知识网络的单个单元,神经元细胞,了解,作为一个整体的网络是非常重要的,完成的图片神经元沟通。为研究神经元网络活动的方法之一是使用厚的片制剂(约300微米)的神经组织,因为大多数的研究轴突切片内的细胞之间的连接保持在这样的保守的准备工作。

 

方便切片的制备与徕卡体视显微镜

急性切片进行活细胞成像和/或膜片钳编制是一个非常耗时的过程。与细腻的组织切片工作需要极大的耐心,经验和柔和处理的样品,以避免干扰的神经网络振动或其他物理压力。在筹备过程中一个可靠,精确和方便使用的仪器以优异的光学像徕卡立体显微镜,有助于最大限度地减少应力,试样和实验者。

 

在实验过程中避免震动

避免生理上的压力继续一次切片的标本已经转移到实际的膜片钳设置。这里,显微镜的任何操作(例如,改变物镜,使用滑块,聚焦等)可以扰乱轴突内的切片或所获取的膜片钳配置的连接。

徕卡DM6000 FS固定台显微镜是专为片准备工作。由于它的智能机动化,它可以让所有的显微镜功能,对比的方法来改变放大倍率之间切换,操作没有触摸显微镜,导致无振动实验传导。

 

智能自动化节省时间和资源

因此,优化的自动化概念保存样品从意外中断,从而节省时间和资源。由于所有的载流元件被关闭,如果不使用,徕卡DM6000 FS提供超高的电子稳定演唱会与卓越的光学和机械稳定性。结合徕卡IRAPO HCX25X0.95 nA水浸物镜,这使得放大倍率转换器使用,而不是改变物镜,徕卡DM6000 FS固定台显微镜,膜片钳和活细胞成像的最佳选择片的准备。

绿色荧光蛋白标记的嗅感觉神经元

 

1.钙染料型Fluo-4负载细胞绿色荧光蛋白标记的嗅感觉神经元的鼠标主要嗅觉上皮细胞在急性片(微分干涉对比)。图片由daniela Flügge 博士,亚琛工业大学亚琛大学,德国。

 

 

2.徕卡DM6000 Fs的固定台显微镜是一个完全自动化的高端研究仪器适用于先进的成像实验,除了电工作。凭借其智能的自动化概念,在显微镜的所有操作(例如,物镜/变倍,聚焦,对比的方法之间切换)正在进行的实验过程中进行,而不会造成任何振动。由于所有的载流徕卡DM6000 Fs的元素和电动机被关断,如果在不使用,固定舞台显微镜有助于消除电气噪声的膜片钳安装。

 

 

3.徕卡HCX IRAPO I 25x/0.95 W的高水浸物镜是特别设计用于电的应用程序和近红外DIC。它结合了一个相对低放大倍数(25倍),具有高数值孔径(0.95),它允许使用没有得到空放大的倍率换。因此,物镜几乎已经过时了。此外,物镜上有一个非常陡峭的角度(41°)一个很长的自由工作距离(2.5毫米),以确保方便地访问的移液管到样品中。

 

 

4.钙染料型Fluo-4负载细胞在急性小鼠主片的共焦图象嗅上皮活细胞成像用Leica DM6000 CFS固定阶段收购显微镜。图片由daniela Flügge 博士,德国亚琛工业大学。

 

 

 

 

 

相差与星形胶质细胞

1.GFP标记的嗅感觉神经元相差与星形胶质细胞的共培养的海马神经元中的对比度的图像。“补丁-移液管连接到准备用于记录的细胞。图片由 Ainhara Aguado博士,德国波鸿鲁尔大学。

 

 

2.徕卡倒置显微镜DMI系列是完美的工具来执行养殖或其他贴壁细胞的电生理和活细胞成像。有了模型从非机动车全电动版本,所有的需求都包括在内。

结合设备像徕卡快的滤光轮,量身定制的孵化室,机动阶段,用户友好,功能强大的LAS AF软件,你可以建立补丁夹紧和/或成像设置,完全满足您的要求。

 

 

3.徕卡快速外部滤光轮的波长进行快速无振动的变化在24毫秒之内(相邻位置),使他们的最快的滤光轮市场。四滤光轮,可同时与5个可自由定义的位置激发和最大的灵活性的排放侧和一个伟大的上不同的应用程序的数量。由于我们的成像设备(如摄像机,过滤器通过LAS AF轮毂,百叶窗)时性操作的特殊的音序器电路板软件,只需点击几下鼠标,我们提供超高的成像速度。

 

 

4.GFP标记的嗅感觉神经元的急性分离。图片来源:Jennifer spehr博士,德国亚琛工业大学。  

 

 

 

 

 

徕卡神经学显微镜

神经学系统

 

徕卡显微镜神经学的应用

贴壁培养或游离细胞工作

膜片钳或活细胞成像的贴壁细胞主要有两个原因:是为了获得一个特定的培养或新鲜分离的细胞类型的细胞生理信息,另一种是内获取信息的特定分子的行为一个生理过程,例如离子通道的信号级联。对于第一个,感兴趣的身体是培养或解离的细胞本身。对于后者,该信元类型起的作用不大,作为重点是在特定的生理过程中可能发生的各种细胞中,或可能被模仿在一个易于培养商业的感兴趣的基因的转染细胞系。

 

培养或游离细胞是完美的样本进行活细胞成像

培养(或分离的)贴壁细胞生理研究的一个优势是,这些细胞通常存在于单细胞层和方便灌注的物质(如酶抑制剂或激活的离子通道)。此外,这些标本产生的杂散光与荧光激发光,从而缩短曝光时间。这节省了从光漂白的和有害的照射,这是有利的两个高速成像和长期活细胞成像实验样品。

 

最适合细胞倒置显微镜工作

大多保持在培养皿培养或游离细胞。这意味着,倒置显微镜可以用来进行活细胞成像或膜片钳实验。方便工作与培养皿倒置显微镜和周围的样品,提供了很大的空间,足够的的多种微量移液器,吸,灌注针头及其他设备的位置。

此外,细胞膜片钳移液器执行电生理实验很容易访问的。

 

设计您的显微镜设置

徕卡显微系统提供一个完全自动化的版本等高端应用相结合的补丁夹紧范围从非电动的版本为常规应用(徕卡DMI3000 B),通过先进的应用程序的完全编码和部分电动显微镜(LEICA DMI4000 B)倒置显微镜和高速多通道活细胞成像(徕卡DMI6000 B)。

外围设备,如超高速外部滤波器轮(波长切换,在不到24毫秒)和量身定制的气候室,使您的活细胞成像显微镜的顶尖研究了高端的设置。